RT-PCR

Transcriptases Invertidas (RTs) são polimerases de ADN orientadas por RNA que sintetizam uma cópia de ADN (cDNA) a partir de um RNA alvo. Para aplicar a PCR ao estudo do RNA, a amostra de RNA deve primeiro ser transcrita para cDNA para fornecer o modelo de ADN necessário para a PCR subsequente.

Em RT-PCR, após uma etapa inicial de transcrição reversa para produzir o modelo de cDNA, a PCR é realizada para amplificar a sequência alvo. Em RT-PCR de uma etapa, a transcrição inversa e a PCR são realizadas numa única mistura de reacção. Em RT-PCR de duas etapas, a reacção de transcrição inversa é executada separadamente, e o cDNA produzido é adicionado a uma PCR subsequente.

AMV Reverse Transcriptase é recomendada para RT-PCR de uma e duas etapas, RT-qPCR, transcrição reversa de RNAs <5kb e extensão primer, particularmente se o RNA modelo tiver uma forte estrutura secundária.

M-MLV Reverse Transcriptase RNase H- point mutant é a enzima de escolha para a transcrição inversa de RNAs longos para a construção de bibliotecas cDNA, geração de sondas cDNA e extensão de primer.

GoScript™ Reverse Transcriptase é uma formulação de M-MLV optimizada para utilização em RT-qPCR de uma e duas etapas e transcrição inversa de alvos raros e abundantes. O GoScript funciona bem na presença de muitos inibidores de amplificação comuns.

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