Le trascrittasi inversa (RT) sono DNA polimerasi dirette all’RNA che sintetizzano una copia di DNA (cDNA) da un RNA bersaglio. Per applicare la PCR allo studio dell’RNA, il campione di RNA deve prima essere trascritto inversamente in cDNA per fornire il modello di DNA necessario per la successiva PCR.
Nella RT-PCR, dopo una fase iniziale di trascrizione inversa per produrre il modello di cDNA, viene eseguita la PCR per amplificare la sequenza target. Nella RT-PCR one-step, la trascrizione inversa e la PCR vengono eseguite in una singola miscela di reazione. Nella RT-PCR in due fasi la reazione di trascrizione inversa viene eseguita separatamente e il cDNA prodotto viene aggiunto a una successiva PCR.
AMV Reverse Transcriptase è raccomandato per RT-PCR one-step e two-step, RT-qPCR, trascrizione inversa di RNA <5kb ed estensione del primer, in particolare se il template RNA ha una forte struttura secondaria.
M-MLV Reverse Transcriptase RNase H- point mutant è l’enzima di scelta per la trascrizione inversa di RNA lunghi per la costruzione di librerie di cDNA, la generazione di sonde cDNA e l’estensione dei primer.
GoScript™ Reverse Transcriptase è una formulazione M-MLV ottimizzata per l’uso in RT-qPCR one-step e two-step e la trascrizione inversa di target rari e abbondanti. GoScript funziona bene in presenza di molti inibitori di amplificazione comuni.